免疫细胞化学在细菌学中主要用于菌种鉴定和抗原结构的研究。细胞都各自有其特异性抗原,应用特异性抗体的荧光素或酶标记物,可以鉴定任何一种细菌。已经成功地用于鉴定几乎所有致病菌的纯培养。尤其是应用免疫荧光技术具有较其他血清学方法简便、快速和敏感等优点,并能直接进行细菌形态观察。可用于鉴定的材料也比较多样,如培养物、感染组织、病人分泌排泄物,外环境中采集材料(土壤、水、杂物等)。由于此法对某些传染病原能较常规方法作出更快速的诊断,因而具有特殊意义。
免疫细胞化学方法用于研究细菌抗原结构和形态学观察,由于单克隆抗体的应用,比其他方法更为有效。
图16-1 免疫荧光在病原细菌诊断程序中的应用时机
从患者咽部粘膜用棉拭子取标本,作涂片用甲组溶血性链球菌荧光抗体染色,能够很快作出诊断。对于痢疾杆菌、霍乱孤菌、布氏杆菌、炭疽杆菌和脑膜炎双球菌、肺炎双球菌等的实验诊断均有较好的效果(如表16-1)。
利用间接免疫荧光或酶标记抗体法,检测患者血清中的抗体更有价值,广泛用于临床诊断和流行病学研究。
表16-1 免疫荧光细胞化学方法在细菌诊断中的应用评价
菌种 | 疾病 | 标本 | 方法 | 敏感性 | 特异性 | 意义 |
甲组链球菌 | 急性咽峡炎 猩红热 |
咽部培养物 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
急性风湿热 | ||||||
乙组链球菌 | 新生儿败血症 | 阴道拭子 | DIF | 高 | 中 | 快速 |
脑膜炎 | 临床标本 | 鉴定 | ||||
牛型乳腺炎 | 培养物 | |||||
致病性大肠杆菌 | 婴儿腹泻 | 大便 | DIF | 高 | 中 | 过筛 |
杆菌 | ||||||
伤寒沙门氏菌 | 肠伤寒 | 大便 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
沙门氏菌 | 肠炎 | 大便 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
(大多数血清型) | 肠热脑膜炎 | 食品 | 过筛 | |||
环境标本 | ||||||
培养物 | ||||||
志贺氏菌属 | ||||||
宋内氏菌 | 菌痢 | 大便 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
福氏菌 | 菌痢 | 大便 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
百日咳杆菌 | 百日咳 | 鼻咽涂片 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
流感嗜血杆菌 | 细菌性脑膜炎 | 脑脊髓 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
肺炎球菌 | 细菌性脑膜炎 | 脑脊髓 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
脑膜炎球菌 | 细菌性脑膜炎 | 脑脊髓 | DIF | 高 | 高 | 快诊 |
出血点 | (差) | |||||
军团菌病 | 小叶肺炎 | 痰,肺渗出物 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
肺组织切片 | IIF | 快诊 | ||||
李氏菌 | 李氏单核细胞 | 体液涂片 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
增多症 | 组织切片 | |||||
布氏杆菌 | 布氏症 | 胎盘 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
(牛、羊、猪型) | (人、畜) | 病理组织培养物 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
结核杆菌 | 结核病 | 痰及其消化液 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
胎儿孤菌 | 孤菌病 | 子宫阴道粘液 | DIF | 高 | 中 | 诊断 |
类丹毒菌 | 动物感染 | 血液、组织、培养物 | DIF | 较高 | 高 | 诊断 |
放线菌 | 放线菌病 | 扁桃腺病理排泄物 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
钩端螺旋体 | 钩体病 | 尿沉渣,新鲜组织刮片或切片培养物 | DIF | 中 | 高 | 诊断 |
奈瑟氏淋球菌 | 淋病 | 结膜、皮肤破损,关节 液 | DIF | 较高 | 中 | 过筛 |
绿脓杆菌 | 肺炎 | 病理组织 | DIF | 较高 | 中 | 诊断 |
类鼻疽杆菌 | 类鼻疽 | 排泄物 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
病理组织 | DIF | 中 | 高 | 诊断 | ||
马疽杆菌 | 鼻疽 | 排泄物 | DIF | 高 | 高 | 早诊 |
病理组织 | ||||||
脆弱类杆菌 | 败血症 | 血及其他有关临床标本 | DIF | 高 | 较高 | 诊断 |
黑色素源标菌 | 牙周病物 | 病变部位分泌物 | DIF | 高 | 高 | 辅诊 |
脏器脓肿 | ||||||
梭状芽胞杆 | 肉毒中毒 | 食物 | DIF | |||
菌属 | 动物黑腿病 | |||||
变部组织 | ||||||
羊炭疽 | 大便等 | DIF | 高 | 较高 | 辅诊或诊断 | |
气性坏疽 | ||||||
破伤风 | ||||||
结肠炎等 | ||||||
沙眼衣原体 | 沙眼 | 结膜刮片 | DIF | 高 | 高 | 诊断 |
(引自,黄策:免疫荧光和荧光免疫。1983)