早期制备的胶体铁作为阳离子胶体是用于检查组织中阴离子的定位,其制备主要是通过三氯化铁(FeCl3)的煮沸完成的,如有:(1)FeCI3直接煮沸(Hale ,1946):(2)FeCl3溶于甘氨酸和氨水的混和液中(Rinehart,1951):(3)FeCl3倒入煮沸的二甲坤酸钠溶液中(Seno.et al,1983)。或FeCl3与二甲砷酸溶液一起煮沸(Seno ,et al.1985)其后,制备方法不断改进,1986年Murakam 等用水合联胺二甲砷酸-FeCl3煮沸法制备出微细颗粒胶体铁(Fine-granular cationic iron colloid),胶体颗粒小(0.5~1nm),从而使其稳定性及穿透能力大大增加(Murakarmi,et al.1986)。用二甲砷酸代替二甲砷酸钠也可以获得同样胶体,具体步骤如下:在60ml 0.1mol/LFeCl33ml,将混合物加热煮沸至变成深棕红色为胶体砷酸铁。室温冷却后,再以二倍于原体积的0.1mol/LpH7.4的二甲砷酸钠缓冲液(Cacdylate sodium Buffer pH7.4,CB)稀释,即可进行抗体标记。该方法制备的铁胶体呈深红色,颗粒大小1nm左右,在pH4~8范围内稳定,4℃可存放一个月以上,室温存放半个月,阴离子定位分布同Murakami等的胶体铁,与IR-COO-有较强的亲和力,但不与IR-NH+结合。
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- 《实用免疫细胞与核酸》全部内容
- 第五章 免疫金银及铁标记技术
- 第八节 免疫胶体铁细胞化学
一、胶体铁的制备方法
第五章 免疫金银及铁标记技术 - 第八节 免疫胶体铁细胞化学节
第五章 免疫金银及铁标记技术 - 第八节 免疫胶体铁细胞化学节
- 二、抗体的标记和纯化节