六、常用凝胶的技术参数

1.葡聚糖凝胶的某些技术数

种类 干颗粒直径(μ) 分子量分级范围 床体积毫升/克干分子筛 得水值 溶胀最少平衡时间(h) 柱头压力(kPa)(2.5cm直径柱)
肽及球形蛋白质 葡聚糖(线性分子) 室温 沸水浴
Sephadex G-10 40~ 120 ~700 ~700 2~ 3 1.0±0.1 3 1
Sephadex G-10 40~ 120 ~1500 1500 2.5~3.5 1.5±3.5 3 1
Sephadex G-25
粗级 100~300
(≈5~100目)
中级 50~150
(≈100~200目)
1,000~5,000 100~5,000 4~6 1.5±0.2 6 2
细级 20~800(≈200~400目)
超细 10~40
Sephadex G-50
粗级 100~200
中级 50~150 1,500~ 500~
细级 20~80 30,000 10,000 9~11 5.0±0.3 6 2
超细 10~40
Sephadex G-75
40~120 3,000~ 1,000~
超细 10~40 70,000 950,000 12~15 7.5±0.5 24 3 3.92~15.86
Sephadex G-100
40~120 4,000~ 1,000~
超细 10~40 1,500,000 150,000 15~20 10.0±1.0 48 5 2.35~9.41
Sephadex G-150
40~120 5,000~ 1,000~ 20~30
超细 10~40 400,000 150,000 18~22 15.0±1.5 72 5 0.88~3.53
Sephadex G-200
40~120 5000~ 1000~ 30~40
10~40 800,000 200,000 20~25 20.0±2.0 72 5 0.39~1.57

2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数

型号 排阻的下限(分子量) 分级分离范围(分子量) 膨胀后的床体积(ml/g干凝胶) 膨胀所需最少时间(室温,h)
Bio-gel-P-2 1,600 200~2,000 3.8 2~4
Bio-gel-P-4 3,600 500~4,000 5.8 2~4
Bio-gel-P-6 4,600 1,000~5,000 8.8 2~4
Bio-gel-P-10 10,000 5,000~17,000 12.4 2~4
Bio-gel-P-30 30,000 20,000~50,000 14.9 10~12
Bio-gel-P-60 60,000 30,000~70,000 19.0 10~12
Bio-gel-P-100 100,000 40,000~100,000 19.0 24
Bio-gel-P-150 150,000 50,000~150,000 24.0 24
Bio-gel-P-200 200,000 80,000~200,000 34.0 48
Bio-gel-P-300 300,000 100~400,000 40.0 48

3.琼脂糖凝胶的技术数

型号 琼脂糖含量
%(W/W)
排阻的下限
(分子量)
分级分离的范围(分子量) 生产厂家
Sepharose 4B 4 0.3×106~3×106 Pharmacia
Sepharose 2B 2 2×106~25×106
Sagavac 10 10 2.5×105 1×104~2.5×105 Seravac
Sagavac 8 8 7×105 2.5×104~7×105
Sagavac 6 6 2×106 5×104~2×106
Sagavac 4 4 15×106 2×105~15×106
Sagavac 2 2 150×106 5×105~15×107
Bio-gel A-0.5M 10 0.5×106 <1×104~0.5×106 Bio-Rad
Bio-gel A-1.5M 8 1.5×106 <1×104~1.5×106
Bio-gel A-5M 6 5×106 1×104~5×106
Bio-gel A-15M 4 15×106 4×104~15×106
Bio-gel A-50M 2 50×106 1×105~50×106
Bio-gel A-150M 1 150×106 1×106~150×106

4.各处凝胶所允许的最大操作

凝胶 最大静水压(kPa)
Sephadex
G-10 9.8
G-15 9.8
G-25 9.8
G-50 9.8
G-75 4.9

5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范

凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp)
0.5 1000~30000
0.7 800~12000
1.0 500~10000
1.2 400~7000
1.5 200~3000
2.0 50~2000

6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速

凝胶浓度(%) 溴酚蓝 二甲苯青FF
5.0 35bp 140bp
6.0 26bp 106bp
8.0 19bp 75bp
10.0 12bp 55bp
20.0 8bp 28bp

7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速

凝胶浓度(%) 溴酚蓝 二甲苯青FF
3.5 100bp 460bp
5.0 65bp 260bp
8.0 45bp 160bp
12.0 20bp 70bp
15.0 15bp 50bp
20.0 12bp 45bp