二、酶法

1.原理

血清中游离脂肪酸或非酯化脂肪酸(NEFA),经酶试剂作用生成紫色化合物,其颜色深浅与NEFA含量成正比。

2.试剂组成

代号 种类 组成 浓度贮存 贮存
R1 缓冲液 磷酸缓冲液
MgCl2
去垢剂
0.04mmol/LpH6.9
3mol/L
R2 酶/辅酶 乙酰CoA合成酶
抗坏血酸氧化酶
CoA
ATP
4-AAP
溶于10ml R1液中
≥0.3U/ml
≥1.5U/ml
0.9mmol/L
5.0mmol/L
1.5mmol/L
冷藏5日
R3 酶稀释液 苯氧乙醇
去垢剂
0.3%(V/V)
R4 马来酰亚胺
该试剂与R3等体积混合
10.6mmol/L
R5 酶试剂 乙酰CoA氧化酶
过氧化物酶
TOOS
混合上述试剂,再等体积R4试剂混合
≥10U/ml
7.5U/ml
0.2mmol/L
冷藏5日
R6 标准液 1mmol/L 冷藏

*应用带玻塞离心管

3.操作

按图15-8操作。

4.计算

血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

图15-7 血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

图15-8 血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

(胡汉宁 储建中)