一、乙酰丙酮法

1.原理

血清中加入异丙醇抽提取甘油三酯,经KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸,甘油在过碘酸作用下氧化成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色的3,5二乙酰,1,4二氢甲基吡啶,其颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比,420nm测定定量。该法可用于基本功训练及组织细胞TG的提取测定。

2.试剂组

代号 种类 浓度 组成 贮2-8℃ 有效时间
R1 抽提液 (CH3)CHOH(A.R)重蒸馏
R2 吸附剂 氧化铝,水洗除去微细颗粒, 110℃烤干3h以上 闭封 一周
R3 皂化剂 5% KOH 5g+H2O→100ml
R4 醋酸溶液 2mol/L CH3COOH 11.5ml+H2O→100ml
R5 过碘酸钠 0.05mol/L NaIO41.07g+H2O→100ml
R6 氧化剂 R4 1体积+R51体积 一周
R7 醋酸铵液 CH3COONH215.4g+H2O→100ml
R8 显色剂 CH3COCH2COCH30.75ml+R-1
40ml+R-7 100ml+R-4 80ml
R9 参考液 2mg/dl 三油酸甘油酯2mg+R-1→100ml(TG100mg/dl)

3.操作

按图15-3操作。

血清甘油三酯(乙酯丙酮法)测定操作图

图15-3 血清甘油三酯(乙酯丙酮法)测定操作图

4.计算

血清TG浓度=ESA/EST×1.13(mmol/L)