血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H2O2，H2O2与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。
（一）手工测定法
1．试剂组成
| 代号 | 种类 | 浓度 | 贮存2～8℃ |
| R1 | 磷酸甘油氧化酶 | ≥3.0KU/L | 冷藏 |
| （A液） | 抗坏血酸氧化酶 | ≥1.0KU/L | |
| 甘油激酶 | ≥0.7KU/L | ||
| 4-氨基安替比林 | 80mg/L | ||
| R2 | 脂蛋白脂酶 | ≥2.0KU/L | 冷藏 |
| 过氧化物酶 | ≥10KU/L | ||
| ESPAS | 300mg/L | ||
| R3（参考液） | 甘油酸三脂 | 200mg/dl（2.26mmol/L） | 冷藏 |
*：一般采用商品试剂盒
图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图
2．操作
按图15-4操作。
3．计算
血清TG浓度=ESA/EST×2.26(mmol/L)
（二）生化分析仪检测
全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。
1．试剂
A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。
B液：POD，Lipase,ESPAS等。
标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。
2．上机参数
| 名称 | 参数 |
| 方法 | 终点法 |
| 波长 | 双波长（540nm 700nm） |
| 试剂A反应时间 | 2～3min |
| 试剂B反应时间 | 5～6min |
| 反应温度 | 37℃ |
| 样本用量 | 4μl |
| 试剂A用量 | 200μl |
| 试剂B用量 | 100μl |
| 单位 | mmol/L |
3．操作过程
4．计算
以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。
5．注意事项
①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。
②试剂在有效期内2～8℃避光保存。
③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。
