三、Apo(a)基因的多态性

血浆Lp(a)的浓度与Apo(a)蛋白质的大小成反比,即Apo(a)的分子量愈大,则Lp(a)的浓度愈低;Apo(a)的分子量愈小,则Lp(a)的浓度愈高。Apo(a)的分子量在400~800KDa之间。按照Apo(a)在聚丙烯凝胶电脉时相对于ApoB100(分子量为520KDa)的迁移率,Utermann等人于1987年将Apo(a)归类为六种多态型;F比ApoB100迁移快;B与ApoB100迁移率相等;S1,S2,S3,S4比ApoB100迁移慢。现已证实。Apo(a)蛋白质的多态型是由Apo(a)基因中Kringle-4的数目变化而引起的。Kring-4基因片段含有几个稀少的限制性酶切部位(NotI,SfiI.KspI,Sval,KpnI),这为加速筛选Apo(a)基因的多态性提供了帮助。表4-5列举在奥地利北部Tyrolean区高加索人群中用KpnI作工具所测得的RFLP与1-4Kringe的数目、Apo(a)蛋白质的大小以及血浆Lp(a)浓度的关系。

表4-6 Apo(a)Kpni 片段与Apo(a)蛋白质多态型、Kringle-4功能区数目以及血浆Lp(a)浓度之关系

表现分子量(KDa) KpnI片段(Kb) Kringle-4数目 等位基因 数目 平均Lp(a)浓度(mg%) KpnI片段频率(%)
F <450 37-49 11-13 1-3 * <0.2
B ~500 55-66 14-16 4-6 61.7 1.2
S1 ~550 72-82 17-19 7-9 34.4 3.8
S2 ~600 88-99 20-22 10-12 24.5 11.2
S3 ~650 105-116 23-25 13-15 10.2 13.7
S4 >700 121-210 26-42 16-32 <5.7 70.1

*:样本量太小,资料缺如。(源自:Utermann,G.In:The metabolic andmolecular bases of inherited disease.7th ed, Vol.Ⅱ,eds.Scriver,C.R.etal.p1897,McGraw-Hill.Inc.,New York,1995)

由表4-6可看出,血浆Lp(a)的浓度亦与Kpn片段的大小成反比。这为血浆Lp(a)与Apo(a)多态型的大小成反比从基因DNA水平提供了直接的证据。

Scana等人在Kringle-4第37个重复区(KIV-37,又称为KringleⅣ-10)检测出了两种突变:一种突变导致第72个氨基酸被精氨酸取代;另一种突变导致第66个氨基酸苏氨酸被蛋氨酸取代。前者致使其Lp(a)不能与赖氨酸结合,且血浆Lp(a)浓度降低。后者似乎与Lp(a)浓度无关。Mooser等人报道在距第1第外显子5’端1.3Kb区或内,由5个核苷酸[(TTT-TA)n]构成的VNTR与其血浆Lp(a)浓度相关。此外。亦有报道Apo(a)基因5’端侧翼区DNA序列的多态性控制血浆Lp(a)的浓度。