根据酶的组成成份，可分单纯酶和结合酶两类。
单纯酶(simpleenzyme)是基本组成单位仅为氨基酸的一类酶。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脲酶、消化道蛋白酶、淀粉酶、酯酶、核糖核酸酶等均属此列。
结合酶(conjugatedenzyme)的催化活性，除蛋白质部分(酶蛋白apoenzyme)外，还需要非蛋白质的物质，即所谓酶的辅助因子(cofactors)，两者结合成的复合物称作全酶(holoenzyme)，即：
| 全酶 | =酶 蛋 白 | + 辅助因子 |
| (结合蛋白质) | (蛋白质部分) | (非蛋白质部分) |
酶的辅助因子可以是金属离子，也可以是小分子有机化合物。常见酶含有的金属离子有K+、Na+、Mg2+、Cu2+、(或Cu+)、Zn2+和Fe2+(或Fe3+)等。它们或者是酶活性的组成部分；或者是连接底物和酶分子的桥梁；或者在稳定酶蛋白分子构象方面所必需。小分子有机化合物是些化学稳定的小分子物质，其主要作用是在反应中传递电子、质子或一些基团，常可按其与酶蛋白结合的紧密程度不同分成辅酶和辅基两大类。辅酶(coenzyme)与酶蛋白结合疏松，可以用透析或超滤方法除去；辅基(prostheticgroup)与酶蛋白结合紧密，不易用透析或超滤方法除去，辅酶和辅基的差别仅仅是它们与酶蛋白结合的牢固程度不同，而无严格的界限。
现知大多数维生素(特别是B族维生素)是组成许多酶的辅酶或辅基的成分(见表2-1)。它们的化学结构式见生物氧化章。体内酶的种类很多，而辅酶(基)的种类却较少，通常一种酶蛋白只能与一种辅酶结合，成为一种特异的酶，但一种辅酶往往能与不同的酶蛋白结合构成许多种特异性酶。酶蛋白在酶促反应中主要起识别底物的作用，酶促反应的特异性、高效率以及酶对一些理化因素的不稳定性均决定于酶蛋白部分。
表2-1 B族维生素及其辅酶形式
| B族维生素 | 辅酶形式 | 主要作用 |
| 硫胺素(B1) | 硫胺素焦磷酸酯(TPP) | α-酮酸氧化脱羧酮基转换作用 |
| 硫辛酸 | 6,8-二硫辛酸 |
α-酮酸氧化脱羧 |
| 泛酸 | 辅酶A(CoA) | 酰基转换作用 |
| 核黄素(B2) | 黄素单核苷酸(FMN) 黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD) |
氢原子转移 氢原子转移 |
| 尼克酰胺(PP) | 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+) |
氢原子转移 氢原子转移 |
| 吡哆素(B6) | 磷酸吡哆醛 | 氨基酸代谢 |
| 生物素(H) | 生物素 | 羧化作用 |
| 叶酸 | 四氢叶酸 | “一碳基团”转移 |
| 钴胺素(B12) | 5-甲基钴铵素 5-脱氧腺苷钴铵素 |
甲基转移 |
