据中国医药报四川讯 四川大学华西医院骨科张文韬博士等,应用人成骨肉瘤MG63细胞,以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增量相结合的耐药诱导方法,成功建立一稳定的人成骨肉瘤多药耐药细胞系——MG63/R。这一新型耐药细胞系,目前国内尚未见报道。
据介绍,临床恶性肿瘤化疗后多药耐药现象的发生,是影响肿瘤患者疗效和预后的主要因素之一。因此,建立多药耐药细胞模型,是体外研究肿瘤耐药的基础。有研究表明,顺铂是骨肉瘤化疗的重要药物,但其在临床初始化疗缓解后常产生耐药性,严重影响了治疗效果。
为探讨顺铂对骨肉瘤细胞的耐药机制、特征及交叉耐药等问题,张文韬等研究人员选择顺铂为诱导药物,以MG63细胞为诱导对象,开展人成骨肉瘤细胞多药耐药的建系研究。他们将MG63细胞经过传代培养、耐药诱导、药敏实验和生长测定等186天的系列技术处理及稳定的28代传代后,建立成功“人成骨肉瘤多药耐药细胞系MG63/R”。
检测结果显示:MG63/R为贴壁生长,形态多样,核仁大而清晰,细胞膜多突起,粗面内质网丰富,染色质深。MTT检测表明,MG63/R对顺铂的耐药指数极高,为83.5,而对阿霉素、长春新碱等化疗药物,均产生不同程度的交叉耐药性。周期分析发现,MG63/R耐药细胞的G1期和G2期细胞明显减少,S期细胞明显增加,即出现细胞增殖指数明显增加、细胞凋亡指数明显降低的耐药特征。
研究人员认为,耐药指数是评价新建耐药细胞系的重要标准,耐药指数小于5为低度耐药,5~15为中度耐药,大于15为高度耐药。本研究建立的MG63/R细胞系,其耐药指数不仅高出耐药标准的数倍,而且在细胞形态、细胞周期分布、耐药基因表达及生物学特性等方面,明显优于原亲本细胞(MG63)。这一耐药细胞系的建立,为进一步研究人成骨肉瘤顺铂多药耐药机制和耐药治疗,提供了崭新的平台。