有试管法和玻片法。
(1)试管法:
①取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A、B,用滴管分别加抗A、抗B和抗A、B分型血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%~5%红细胞盐水悬液1滴,混合。
②另取洁净小试管3支分别标明A,B和O型细胞,用滴管分别加入受检者血清1~2滴于底部,再分别以滴管加入A、B和O型3%试剂红细胞悬液1滴混匀。
③120g离心1分钟或1300g离心15秒。
④将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜检查。
⑤观察结果时,既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A,B亚型、类B或cisAB的发现。
(2)玻片法:
①清洁玻片一张(或白瓷版一块)。标明抗A、抗B和抗A、B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A、B分型血清1滴,再加受检者3%~5%红细胞悬液1滴,混合。
②另取洁净玻片一张(或白瓷板一块)。标明A细胞、B细胞和O型试剂,分别加红细胞悬液1滴。
③将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动(在室温18~22℃),使血清与细胞充分混匀连续约15分钟,以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。如以玻片试验时,也可用低倍镜观察结果。