植物中存在着大量结构与雌激素相似,能结合并激活哺乳动物和人类的雌激素受体,并具有雌激素样活性的有效成分。这些化学成分富含于某些中药之中,如黄芪、黄芩、三七、柴胡、白果、麦冬、仙鹤草、芦荟、木贼、虎杖、罗布麻、金钱草、鱼腥草、陈皮等都含有黄酮和异黄酮类成分;桑白皮、陈皮、甘草、满山红、紫花杜鹃中含有二氢黄酮;槐花、紫菀、银杏叶、满山红叶中含有黄酮醇;补骨脂、蛇床子、白芷、前胡、独活、茵陈、秦皮等都含有香豆素;五味子、连翘、牛蒡子、细辛等含木脂素等。
有关雌激素的脑保护作用,一直是国内外神经科学领域的研究热点。选用富含雌激素成分的中药组成复方,进行脑保护作用的研究是新的研究思路。《中国临床康复》2004年第8卷第34期报道了南京大学医学院附属鼓楼医院张博生、徐运等对含雌激素中药脑保护作用的研究成果。目的旨在探讨含雌激素中药对实验动物缺血后脑损伤的保护作用及其临床意义。
方法:选用健康成年雄性SD清洁级大鼠30只。动物随机分为两组:对照组15只,中药组15只。中药制备:按黄芪∶三七∶黄芩∶麦冬(5∶1∶1∶1)比例称取药物,常法煎煮,60℃水浴浓缩成2g/mL药液备用。试剂用兔抗雌激素受体。
动物模型制作:分别给予饮用水、中药胃灌注7天后,采用一侧大脑中动脉线栓法制成局灶性脑缺血再灌注模型。大鼠经氯氨酮80mg/kg腹腔注射麻醉,颈部切口,游离颈外动脉,电凝切断其分支动脉,并在远处结扎。尼龙线由颈外动脉经颈内动脉插入大脑前动脉以阻塞大脑中动脉起始处,出现局灶性神经功能缺损的为模型制备成功。缺血2小时后再灌注,12小时和24小时后处死。每组6只取脑切片,TTC染色,计算梗死面积。其余取缺血侧皮质,提取蛋白,准备作雌激素受体β测定。
评估标准:脑梗死面积测定:将大鼠断头取脑。将脑迅速置于-80℃冰箱中冷冻,2小时后取出,切成1mm厚的脑片,置于质量浓度为20g/L的TTC中染色,37℃孵育30分钟。选择每一切片的尾侧面用HPIAS1000高清晰度图像处理系统进行图像分析,测量每片的梗死面积。免疫印迹蛋白测定:提取的蛋白溶解在2XSDS凝胶缓冲液中,然后煮沸5分钟。在质量浓度为40~200g/L聚丙烯酰胺凝胶上电泳。转到PVDF膜上。浸在质量浓度为50g/L牛奶/TBST室温1小时,去除非特异性结合。加兔抗雌激素受体后测定其蛋白表达。洗膜后再用actin抗体,作为标本量定量。
主要观察指标:用雌激素受体β蛋白表达的条带密度与actin表达的条带密度之比为雌激素受体的实际表达量。
结果显示:中药组脑梗死面积再灌注12小时时为40.62±1.68%、再灌注24小时时为58.89±2.12%,与对照组相比,差异有显著性意义(p<0.05);免疫印迹蛋白测定,中药处理组缺血侧脑皮质雌激素受体表达高于空白对照组。
研究人员指出:黄芪、三七、黄芩、麦冬均富含黄酮和异黄酮,其是具有雌激素样活性的有效成分。黄芪又是治疗脑卒中的传统名方补阳还五汤的主药,其对脑卒中的治疗有肯定的疗效。实验结果表明,缺血2小时后再灌注12小时和24小时,与对照组相比,中药组脑梗死面积明显小于空白对照组,并有显著意义。说明本中药复方有明显的脑保护作用。